PCR技术在食品微生物检测中的应用
【摘 要】在食品检测中食品微生物检测是关键的环节,对提升食品安全性与可靠性有重要的现实意义。PCR技术,又称为聚合酶链式反应,由于其具备操作便捷、正确率高以及检测迅速的特点,因此其被广泛应用于食品微生物检测中。本文分析PCR技术在食品微生物检测中的应用特征,提出PCR技术在食品微生物检测中的实际应用。
【关键词】PCR技术、食品;微生物检测
PCR技术是对特定DNA片段进行扩增的方式。该技术最早由美国研究学者提出且开发。因为该技术本身的特征,被广泛应用于食品微生物检测中。采用PCR技术能够缩短具体操作实践,确保食品微生物检测结果的正確性,而且可以严格筛查致病的微生物。当前,世界各国人都在关注食品安全问题。因此,PCR技术在食品微生物检测中有一定的指导意义。
一、PCR技术在食品微生物检测中的应用特征
(一)操作方便快捷
传统的自动化检测技术,不仅缺乏高度,而且花费大量的时间,不能有效提高微生物检测工作效率。微生物检测工作涉及内容是多方面的,主要包括:微生物生长环境的生长温度、微生物生长应用的培养基等等,由于不同的微生物类型,因此其花费的时间、人力和物力是不同的,必须要仔细观察培养基中菌落特点和微生物生理变化等等。传统的自动化检测技术检测步骤是相当多的,尽管投入许多时间和精力,但是工作效率无法提高。[1]相对于传统的自动化检测技术,高自动化检测技术的应用取得明显的检测效果。比如:应用PCR技术,其操作方便快捷的特点与传统自动化检测技术的特征形成鲜明的比较,只需要一个人,实现人机一体化,就可以控制各个检测程序,这种方便的检测步骤可以提高工作效率,开拓我国现代化食品行业的市场发展空间。
(二)正确率高
在经济迅速发展的时代,我国各种类型的食品微生物种类是多样化的,传统的自动化检测技术要检测微生物具有较大的难度,不能准确辨识食品微生物的类型。其中,关键性的难题是检测活性较弱的菌落,一般情况下难以检测和培养,不能保证食品微生物检测工作正常开展。但是当前我国PCR技术可以改善这个问题,采用高自动化技术可以准确检测食品中微生物的类型,为食品安全监督提供重要的依据,为我国食品安全提供保障。
(三)检测迅速
在传统的自动化检测技术中,食品微生物检测需要2天-4天的时间,有时需要1周或者1周以上,因为检测时间相对较长,所以经常出现食品已经投向市场而检测结果没有出来的情况,突出体现传统自动化检测具有耗时的缺陷,对我国食品行业实际生产运行造成负面影响,从而直接影响我国经济的持续稳定发展。[2]PCR技术的应用,可以有效解决这个弊端,在短时间内可以得出检测结果,通常只需要几个小时,最长的时间是1天。因此,PCR技术对我国食品行业的发展具有重要的现实意义。
二、PCR技术在食品微生物检测中的实际应用
(一)常规的PCR技术
常规的PCR技术是最基本的检测技术。将这项技术应用于食品微生物检测中,将适量的聚合酶添加到引物的混合物与食品微生物的DNA模板中。在催化的情况下,DNA出现片段扩增的现象,并且片段扩增在DNA模板上完成,扩增周期的不同,DNA表现也是不同的。常规PCR技术的各个周期,DNA都会扩增相对应的片段,可以循环使用DNA模板,使常规PCR中的聚合酶反应可以持续进行,不断提高产物量。一般情况下,常规的PCR技术能够检测食品中的所有菌类,检测率高达99%。食品微生物检测中应用PCR技术,能够提升食品的可靠性与安全性,防止出现微生物污染的情况。
(二)Rt-PCR 技术
食品微生物检测中的Rt-PCR 技术是指聚合酶链反应,将微生物的RNA作为模板获得cDNA,再将cDNA当做模板,进行PCR的扩增处理,表现食品微生物的DNA片段。[3]与其他的检测技术相比,Rt-PCR技术的检测效率是较高的,具有高灵敏度的优势,在食品微生物检测中,这项技术可以提高两个数量级,正确鉴别食品样品的微生物。并且Rt-PCR可以迅速区别微生物特点,有助于提高微生物检测的正确性,防止出现检测落实不到位的问题,
(三)免疫PCR技术
免疫PCR技术将食品微生物中的DNA作为标记物,在免疫操作中扩增PCR。免疫PCR技术将PCR扩增与抗原抗体反应结合,增加微生物检测的灵敏度。[4]食品微生物检测中的免疫PCR技术,能够任意选择DNA进行分析,将DNA分子固定后合成引物,每个检测对象都可以采用该引物。多用生物素是免疫PCR技术的连接分子,具有独立的特点。两种独立生物素的结合点,分别连接亲和素和DNA分析,形成一种持续性的复合物,PCR扩增复合物标识出食品微生物的DNA。
结语:
综上所述,从食品安全的方面来看,食品微生物检测工作是非常重要的,既可以提高精确度,又可以提高检测的工作效率,为食品安全问题提供坚实的基础。但是目前我国食品微生物检测方法在实际应用中仍旧存在一些问题,比如:检测结果有误差、消耗时间长等等。然而PCR技术在食品卫生检测中应用,具备较强的优势,可以有效解决这些问题。其直接关乎食品的安全,在食品微生物检测中应用PCR技术,能够满足食品安全检测的各种需求。
参考文献
[1]杨丹,郎慧柯.PCR技术在食品微生物检测中的应用价值[J].食品安全导刊,2017(30):96.
[2]胡博.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].现代食品,2017(02):36-37.
[3]孙岩琳.PCR技术在食品微生物检测中的应用探究[J].黑龙江科技信息,2016(11):121.
[4]杨卫军,张小军,张坤朋,张光杰.PCR技术在食品微生物检测中的应用[J].安阳工学院学报,2008(04):16-18.
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